Introduzione L’adesione alle cellule intestinali umane è considerata una delle proprietà principali dei ceppi utilizzati in preparati probiotici. Scopo dello studio è stato quello di analizzare le caratteristiche di adesività dei ceppi probiotici Bifidobacterium lactis BB-12 (Yovis Regola), Bifidobacterium longum W11 (Zir- Fos), e Bifidobacterium bifidum (Bificol) utilizzando le cellule epiteliali umane della linea HT-29 come modello in vitro per l’intestino. La denominazione a livello di specie di Bifidobacterium è quella indicata in etichetta. Materiali e metodi Il saggio di adesione mediante Microscopia a Scansione Elettronica (SEM) dei ceppi in esame alle cellule della linea HT-29, veniva effettuato secondo il metodo descritto da Ali et al. (WASET, 49:149-153, 2009). Un indice di adesione (ADI) delle cellule batteriche adese veniva calcolato, mediante microscopia ottica ad immersione (LEICA DMLB), come il numero di batteri adesi su 100 cellule HT-29, facendo la media dei batteri adesi in dieci differenti campi microscopici, utilizzando la metodica descritta da Guglielmetti et al. (Appl Env Microbiol, 76: 3948–3958, 2010). La probabile formazione di biofilm dei batteri adesi alle cellule HT-29 è stata verificata al microscopio elettronico a scansione (Hitachi S 4000). Risultati Il saggio di adesione mediante SEM ha mostrato per i tre ceppi probiotici saggiati differente adesività sulle cellule della linea HT-29. L’osservazione al microscopio ottico a immersione ha evidenziato per il ceppo di B. bifidum un indice di adesione più alto sia a 30 che a 60 minuti dall’incubazione ( 30 min<1200 e 1200 60 min<2500), rispetto agli altri due ceppi in esame (B. lactis BB-12 30 min<100 e 60 min<1200; B. longum W11 30 min<100 e 60 min<400). Dopo 60 min, l’incremento dell’indice di adesione, nelle condizioni dell’esperimento, è stato più alto soprattutto per B. lactis. Inoltre, l’osservazione SEM ha evidenziato la produzione di strutture biopolimeriche, da parte dei ceppi in esame. Conclusioni I nostri esperimenti in vitro hanno confermato per i tre ceppi probiotici di Bifidobacterium spp. in esame idonee caratteristiche di adesività, anche se hanno mostrato differenze dell’indice di adesione per i tre ceppi. Ulteriori nostri studi sono in corso per caratterizzare i biopolimeri e chiarirne il ruolo nei meccanismi di adesione.
Caratteristiche di adesione di ceppi di Bifidobacterium lactis BB-12, Bifidobacterium longum W11, Bifidobacterium bifidum su cellule epiteliali umane della linea HT-29
STIVALA, Aldo;SINATRA, Fulvia;NICOLOSI, DARIA;BLANDINO, Giovanna
2013-01-01
Abstract
Introduzione L’adesione alle cellule intestinali umane è considerata una delle proprietà principali dei ceppi utilizzati in preparati probiotici. Scopo dello studio è stato quello di analizzare le caratteristiche di adesività dei ceppi probiotici Bifidobacterium lactis BB-12 (Yovis Regola), Bifidobacterium longum W11 (Zir- Fos), e Bifidobacterium bifidum (Bificol) utilizzando le cellule epiteliali umane della linea HT-29 come modello in vitro per l’intestino. La denominazione a livello di specie di Bifidobacterium è quella indicata in etichetta. Materiali e metodi Il saggio di adesione mediante Microscopia a Scansione Elettronica (SEM) dei ceppi in esame alle cellule della linea HT-29, veniva effettuato secondo il metodo descritto da Ali et al. (WASET, 49:149-153, 2009). Un indice di adesione (ADI) delle cellule batteriche adese veniva calcolato, mediante microscopia ottica ad immersione (LEICA DMLB), come il numero di batteri adesi su 100 cellule HT-29, facendo la media dei batteri adesi in dieci differenti campi microscopici, utilizzando la metodica descritta da Guglielmetti et al. (Appl Env Microbiol, 76: 3948–3958, 2010). La probabile formazione di biofilm dei batteri adesi alle cellule HT-29 è stata verificata al microscopio elettronico a scansione (Hitachi S 4000). Risultati Il saggio di adesione mediante SEM ha mostrato per i tre ceppi probiotici saggiati differente adesività sulle cellule della linea HT-29. L’osservazione al microscopio ottico a immersione ha evidenziato per il ceppo di B. bifidum un indice di adesione più alto sia a 30 che a 60 minuti dall’incubazione ( 30 min<1200 e 1200 60 min<2500), rispetto agli altri due ceppi in esame (B. lactis BB-12 30 min<100 e 60 min<1200; B. longum W11 30 min<100 e 60 min<400). Dopo 60 min, l’incremento dell’indice di adesione, nelle condizioni dell’esperimento, è stato più alto soprattutto per B. lactis. Inoltre, l’osservazione SEM ha evidenziato la produzione di strutture biopolimeriche, da parte dei ceppi in esame. Conclusioni I nostri esperimenti in vitro hanno confermato per i tre ceppi probiotici di Bifidobacterium spp. in esame idonee caratteristiche di adesività, anche se hanno mostrato differenze dell’indice di adesione per i tre ceppi. Ulteriori nostri studi sono in corso per caratterizzare i biopolimeri e chiarirne il ruolo nei meccanismi di adesione.I documenti in IRIS sono protetti da copyright e tutti i diritti sono riservati, salvo diversa indicazione.
