Identificazione delle specie batteriche della placca subgengivale quale fattore di rischio per patologie parodontali in donne con variazioni ormonali fisiologiche e parafisiologiche

The main objectives of this study has been to assess the implications of the menopause in patients treated with HRT (Hormone Replacement Therapy ) on their oral health, with particular reference to quantitative changes of the major periodontal pathogens, which may lead to homeostatic alterations in the balance of the microbiota in favour of some species most frequently involved in the etio-pathogenesis of periodontal diseases. We examined 64 patients aged between 45 and 80 years (mean age 59.35 years) in menopause, who accessed the Institute of Pathology, Obstetrics and Gynaecology of the University Hospital Vittorio Emanuele "G. Rodolico " of Catania, 60 of whom were diagnosed with chronic periodontitis. For each patient, samples were collected from the subgingival plaque in 4 sites in the vicinity of 1st and 2nd molar, using sterile paper points. At the time of the visit the following clinical parameters (through the use of a periodontal probe) were collected: bleeding on probing ( Bleeding On Probing BOP), plaque index (Plaque Index, PI) , the depth of the periodontal pocket (Probing Pocket Depth, PPD), gingival recession (gingival recession , REC), mobility of teeth (MOB), and the occurrence of exudate. Samples of sub-gingival plaque of patients were analysed at the Department of Bio-Medical Sciences (Section Microbiology) of the University of Catania, using assays based on the PCR technique, aimed to the a qualitative and quantitative detection of the occurrence of conserved sequences of the 16S rRNA portion of these organisms. This study shows that, despite all the prevention programs, an improved dental hygiene and the fact that chronic periodontitis seemed to be kept under control, over the past few years the frequency of patients suffering from this disease is increasing. 50% of patients, under and not under HRT, apart from circulatory disorders related to menopause, refereed also symptoms associated with mouth inflammations, altered taste perceptions, and xerostomia. The main organisms detected in first and the second sampling were Porphyromonas gingivalis, Fusobacterium nucleatum, Prevotella intermedia, and Prevotella melaninogenica. Porphyromonas gingivalis has been identified in about half of the patients during the first sampling and in the second sampling in 19 of 34 patients, including 10 patients with HRT. Fusobacterium nucleatum in the first specimen was identified in 21 of 34 patients, while in the second sample in 22 of them, of which in 11 patients under HRT. Prevotella intermedia was present in the first specimen only in 12 patients while in the second sample in 14 of 34, of which only 7 patients under HRT. Prevotella melaninogenica was found in 6 of 34 patients at the first sampling and the second in 10 patients, of whom 3 were in the TOS. In 3 patients under HRT no microorganisms were deteceted. Regarding the anaylsed periodontal clinical parameters, statistically significant data were represented by the increase of the index plaque (14/15 HRT+; 18/19 HRT-), the depth of the periodontal pocket (9/15 HRT+; 11/19 HRT-) and then the gingival recession and tooth mobility. The reason for this was mainly due to poor oral hygiene and bad habits (smoking, wrong eating habits, and lack of dentist s checks). The use of HRT in this study did not reduce the prevalence of the reported oral symptoms. This is in contrast to the initial hypothesis of our study. Therefore, further studies with long-term follow-up would be needed to assess the effect of HRT on the parameters of oral health.

I principali obiettivi di questo studio sono stati quelli di valutare le implicazioni della menopausa sulla salute orale, nelle pazienti in trattamento con TOS (terapia ormonale sostitutiva) o meno, con particolare riferimento a modificazioni quali-quantitative dei principali batteri patogeni parodontali, che possono portare ad alterazioni dell equilibrio omeostatico del microbiota a favore di alcune specie più frequentemente coinvolte nell eziopatogenesi delle parodontopatie. A tal fine, sono stati presi in considerazione gli effetti del trattamento ormonale sostitutivo (TOS) usando come termine di paragone il microbiota orale di donne in menopausa non sottoposte a TOS. Sono stati esaminati 64 pazienti di età compresa fra i 45 e gli 80 anni (età media 59 anni) in menopausa clinicamente accertata, che accedevano presso l Istituto di Patologia Ostetrica e Ginecologica dell Azienda Ospedaliero-Universitaria Policlinico-Vittorio Emanuele G. Rodolico di Catania, in 60 dei quali è stata diagnosticata una parodontite cronica. Su tali pazienti sono stati valutati i livelli ormonali, la densità ossea attraverso la MOC e le condizioni di igiene orale mediante la visita e la compilazione di uno specifico questionario anamnestico (ultima visita odontoiatrica effettuata, trattamenti odontoiatrici subiti nel corso degli anni). Per ogni paziente sono stati eseguiti prelievi di placca sottogengivale in 4 siti, in prossimità del 1° e 2° molare, mediante coni di carta sterili o paper point. In sede di visita sono stati raccolti i seguenti parametri clinici mediante l utilizzo di una sonda parodontale: sanguinamento al sondaggio (Bleeding On Probing, BOP), l indice di placca (Plaque Index, PI), la profondità della tasca parodontale (Probing Pocket Depth, PPD), la recessione gengivale (gingival recession, REC), la mobilità degli elementi dentali (MOB) e infine la presenza di essudato, come descritto da Community Periodontal Index of Treatment Needs (CPITN) [Ainamo J, et al. Development of the World Health Organization (WHO) Community periodontal index of treatment need (CPITN). Int Dent J 1982, 32:281-291.] Per quanto concerne i parametri clinici parodontali analizzati, l'aumento dell indice di placca, della profondità della tasca parodontale e quindi delle recessioni gengivali e della mobilità dentale sono stati osservati con maggiore frequenza nei pazienti sottoposti a TOS. La ragione di ciò è dovuta principalmente a una scarsa igiene orale e alle abitudini viziate (fumo, alimentazione errata, mancati controlli dal dentista). Nonostante i programmi di prevenzione dentale e una migliorata igiene orale, da questo lavoro è emerso che, sebbene la parodontite cronica, sembrasse una patologia mantenuta sotto controllo, nel corso degli ultimi anni la frequenza dei pazienti affetti dalla suddetta patologia è in netto aumento. Un dato importante lo si riscontra per l appunto nel soggetto femminile in menopausa, periodo, questo, caratterizzato da cambiamenti fisiologici importanti legati principalmente alla ridotta produzione di estrogeni. I campioni di placca subgengivale sono stati analizzati presso il Dipartimento di Scienze Bio-Mediche (Sez. Microbiologia) dell Università degli Studi di Catania, mediante saggi basati sulla tecnica della PCR, volti alla rilevazione quali-quantitativa della presenza di sequenze conservate della porzione 16S del rRNA di batteri parodontali frequentemente responsabili di parodontopatie tra cui Fusobacterium nucleatum, Porphyromonas gingivalis, Prevotella intermedia, Tannerella forsythia, Treponema denticola. Confrontando i risultati ottenuti tra i pazienti sottoposti a TOS con quelli non in terapia, non sono state riscontrate differenze statisticamente significative.